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2013年执业药师药物分析考点记忆——杂质的去除(1)

2013-05-10 
杂质的去除

  酶提取液中常含有杂蛋白、多糖、脂类及核酸等杂质,可用下述方法去除:

  调PH和加热法:利用蛋白质对酸、碱和热变性方面性质的差异,可去除非活性杂蛋白。如制备脂肪酶时,在pH3、4时以400C温度加热150 min,淀粉酶活力可丧失90%而被除去,而脂肪酶活力仍保持80%以上。

  蛋白质表面变性法:蛋白质表面变性后其性质有所不同,借以去除杂蛋白。如制备过氧化氢酶时,加入氯仿和乙醇进行振荡可以将杂蛋白变性而去除。

  蛋白质沉淀剂法:利用醋酸铝、利凡诺、单宁酸、离子型表 面活性剂等蛋白质沉淀剂可以去除杂蛋白及粘多糖类杂质。使用时要注意这类试剂常可引起酶变性失活,因此应迅速除去。

  选择性变性法:各种蛋白质对变性剂的稳定性不同,可以用选择性变性剂去除杂蛋白。如细胞色素丙对三氯醋酸较稳定,所以在制备时可用2.5%三氯醋酸使其他杂蛋白变性使沉淀除去。

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