(2010-10-19)
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1 传代细胞准备 细胞在转染前24h传代,待细胞密度达50%～60%满底时即可进行转染。加入沉淀前3～4h，用9ml完全培养液培养细胞。
2 DNA沉淀液的准备 首先将质粒DNA用乙醇沉淀(10～50μg/10cm平板)，空气中晾干沉淀，将DNA沉淀重悬于μL无菌水中，加50μL2.5mol/LCaCl2。
3用巴斯德吸管在500μL 2×HeBS中逐滴加入DNA-CaCl2溶液，同时用另一吸管吹打溶液，直至DNA-CaCl2溶液滴完，整个过程需缓慢进行，至少需持续1～2min。
4室温静置30min,出现细小颗粒沉淀。
5将沉淀逐滴均匀加入10cm平板中，轻轻晃动。
6在标准生长条件下培养细胞4～16h。除去培养液，用5ml 1×HeBS洗细胞2次，加入10ml完全培养液培养细胞。
7收集细胞或分入培养皿中选择培养。
